经（jīng）过我们多年（nián）生（shēng）产实践栽培总结（jié）出（chū）来（lái）的经验是选用当年表现优异的羊（yáng）肚菌（jun1）子（zǐ）实体（tǐ）进行组织分离以（yǐ）后，再繁育出来（lái）的菌种进行栽培播种，由于转（zhuǎn）代（dài）次数少，变异（yì）性概率（lǜ）低。再（zài）进行播种，基本可以保障稳定的出菇率。综上所述，掌握（wò）成熟的（de）羊肚菌育种技术是必要的。以下为大家详细的介绍羊肚（dù）菌菌种分离及提纯复壮技术：
一，选（xuǎn）种（zhǒng）菇  正常情况在清晨还没（méi）有浇水之前（qián）采摘6分熟（shú）的，没（méi）有病害感染，虫害咬食的健康羊肚菌作为种菇，还（hái）要看菇形与（yǔ）其（qí）母（mǔ）本的外观（guān）形（xíng）态（tài）相似度越高越好。采（cǎi）菇以后（hòu）不要带土装入塑料（liào）袋中（zhōng），根据不同品种写（xiě）好标签（qiān）。
二，种（zhǒng）菇处理  将（jiāng）采到的种菇进（jìn）行测量，称重，并做好详（xiáng）细记录（lù），测（cè）试种菇（gū）高（gāo），菌柄直径，菌帽直径，和菌帽高度。

三（sān），准备工作（zuò）  将制备好的PDA 培养基试（shì）管，无菌水，储（chǔ）水罐，酒精棉，无菌棉摄子，酒（jiǔ）精灯（dēng），火（huǒ）机（jī），种菇等物品放（fàng）到无菌（jun1）操作台上，将杀菌灯开好（hǎo），无（wú）菌风机同时打开，20分钟后就（jiù）可以进行（háng）分离羊肚菌（jun1）菌种的操作了。也可以在接种箱中（zhōng）进行（háng），把上（shàng）述物品（pǐn）全（quán）部放入接（jiē）种箱。接种箱封闭（bì）好以后用二氯异氰悄酸纳薰蒸（zhēng）30分钟即（jí）可（kě）开始分（fèn）离羊肚菌菌种的工作了。

四，分离菌（jun1）种  1，带好手套，伸入无菌操作台的（de）无菌区，或（huò）接种箱（xiāng）内，先（xiān）用酒（jiǔ）精棉（mián）球对双手手套外表进行（háng）彻底擦拭消毒，然后用无菌水（shuǐ）对羊肚菌种菇（gū）进行（háng）冲（chōng）洗冲洗过（guò）程的水（shuǐ）倒入（rù）储水罐（guàn）中（zhōng），内外都要冲洗，冲洗（xǐ）时间为2-3分钟（zhōng），冲洗以后用无菌棉吸（xī）干（gàn）羊肚（dù）菌（jun1）表（biǎo）面水分。然（rán）后将攝（shè）子用酒精棉（mián）消毒处理以后，放（fàng）在酒精灯火（huǒ）焰顺风方向燃烧消（xiāo）毒，再将羊肚菌菌帽（mào）与菌柄处掰（bāi）断，将菇帽部分放到一（yī）边（biān），只用菌柄部分（fèn），再拿起一支试管（试管和（hé）菌柄同时用（yòng）左手（shǒu）拿好（hǎo），在酒精灯（dēng）火焰顺风处取下棉塞，棉（mián）塞夹在右手中指和无（wú）名指之间，注意塞（sāi）入（rù）试管部（bù）分的棉塞（sāi）向外，不要（yào）与手接触，右手（shǒu）的拇指（zhǐ）和食指拿（ná）摄子夹取菌柄（bǐng）与菌帽断开处的3毫米（mǐ）见方的（de）一（yī）块羊肚菌（jun1）组织，接入试管（guǎn）斜面培养基前端（duān），塞好棉塞，放在（zài）旁边，注意（yì）始终保持试管培养（yǎng）基平面向下（xià），轻拿轻放（fàng）。然后再进行下一支试管的（de）操作。

五，培（péi）养  将分离好的菌种贴好标签：标签（qiān）内容包（bāo）括日期，品（pǐn）种（zhǒng）名称等（děng）信息。然后就可以放在20-23度的条件下恒温培养。注意每（měi）天观（guān）察长势，杂菌感染（rǎn）严（yán）重的（de）及时挑（tiāo）出。感染轻微的可以保留进行（háng）提纯处理。

六（liù），提（tí）纯  在分离（lí）的过（guò）程中（zhōng），难（nán）免有杂菌（jun1）感染（rǎn），根（gēn）据羊肚菌菌（jun1）丝（sī）生长速度（dù）快的特点，即使（shǐ）有羊肚菌菌丝与（yǔ）杂菌（jun1）共（gòng）同萌发生长，经过三天培养，羊（yáng）肚菌菌丝长势会（huì）超过杂菌一大截（jié），遇到这种情况（kuàng）时就可（kě）以进行提纯处理：
1，准（zhǔn）备工（gōng）作：准（zhǔn）备提（tí）纯的（de）菌种，空PDA试管培养基，酒精灯（dēng），酒精棉，接种（zhǒng）钩，火机。消毒处理（lǐ）和上述（shù）方法一致。
2，提纯流程  戴好手套，用（yòng）酒精（jīng）棉（mián）擦拭消毒，将（jiāng）接种钩擦拭消毒，然后在酒精灯火焰顺风方向取下等待提纯菌种试管棉塞，用接种（zhǒng）钩在酒精灯火焰处灼烧消（xiāo）毒处理（lǐ）以后将原来接入的已经感染杂菌的（de）组织块部位的培养基一同（tóng）钩出试管，没（méi）有感染杂菌长有羊肚（dù）菌菌（jun1）丝的培养基保留1-2厘米即可。注意接种钩（gōu）尽（jìn）量不要接触（chù）到杂（zá）菌感染的部分。然后仔细（xì）对接种钩进（jìn）行彻底消毒处理以后就可以取保留的羊肚菌纯菌丝接入新的PDA培（péi）养基中，大小以3毫米见方一块为宜。然后将提（tí）纯（chún）后的试管贴（tiē）好标签，做好记录。再放到20-23度进行恒温培养。
七，菌种保（bǎo）藏（cáng）   分离，提（tí）纯好的羊肚菌菌种以后需要及（jí）时（shí）进行菌种保藏处理，具体请参照菌种保（bǎo）藏方法 在适当的季节进行出菇栽培实验。